Contagious
equine metritis adalah penyakit pada kuda yang menyerang sistem reproduksi,
bersifat sangat menular dan menimbulkan kemajiran (majer /gabuk /kegagalan
kebuntingan) sementara. Penyakit ini disebut juga Contagious Equine Metritis
Organism (CEMO), Haemopilus Equigenitalis, atau Taylorella Equigenitalis.
RINGKASAN
Contagious
equine metritis adalah peradangan endometrium kuda disebabkan oleh Taylorella
equigenitalis, yang biasanya menghasilkan infertilitas sementara. Ini adalah
infeksi nonsystemik, efek yang terbatas pada saluran reproduksi kuda betina.
Jika
ada, tanda-tanda klinis utama adalah sedikit keputihan mukopurulen berlebihan
dan bervariasi servisitis dan vaginitis.
Kesembuhan cepat, karier tanpa gejala berkepanjangan yang bertahan pada
sebagian dari kuda betina yang terinfeksi. Taylorella equigenitalis paling
sering ditularkan melalui kontak seksual dengan kuda pembawa penyakit (karier),
yang selalu tanpa gejala dan dimana tempat utama dari kolonisasi T.
equigenitalis adalah membran urogenital (fosa uretra, sinus uretra, uretra dan
selubung penis). Kebersihan yang tidak memadai selama pembersihan atau
pemeriksaan alat kelamin kuda jantan juga bertanggung jawab sebagai penularan
infeksi.
Tempat
T. equigenitalis persisten pada kuda betina adalah pada membran urogenital,
terutama di sinus klitoris dan fossa dan sangat jarang di dalam rahim. Anak
kuda lahir dari kuda betina karier juga dapat menjadi karier. Organisme ini
dapat menginfeksi spesies equidae selain kuda, misalnya keledai.
Pencucian
dengan disinfektan dikombinasikan dengan pengobatan antibiotik lokal dan
sistemik dapat menghilangkan T. equigenitalis. Vaksinasi telah ditemukan untuk
menjadikan tidak efektif. Sarana utama kontrol adalah melalui pencegahan
penularan dengan memilih kuda jantan dan kuda betina bebas dari T.
equigenitalis sebelum perkembang-biakan dimulai. Penentuan carrier tergantung
pada deteksi T. equigenitalis pada swab urogenital dari kuda betina dan kuda
jantan dan identifikasi yang akurat.
Antibodi
serum untuk T. equigenitalis dapat dideteksi pada kuda selama 3-7 minggu
setelah infeksi dan juga dapat ditunjukkan sesekali pada kuda betina karier,
tetapi tidak pernah pada kuda jantan. Serologi adalah hasil deteksi akhir akhir
ini, tetapi tidak kronis, infeksi pada kuda betina, tetapi penekanan untuk
kontrol penyakit seyogyanya pada deteksi kuda karier dengan kultur.
ldentifikasi
agen: Swab harus dibawa ke laboratorium dengan hati hati untuk menghindari
hilangnya viabilitas. swab harus sepenuhnya terendam dalam media Amies charcoal
dan diangkut ke laboratorium pengujian, sebaiknya dalam kondisi suhu yang
terkontrol, untuk plating dalam waktu 48 jam dari koleksi.
Pertumbuhan
T. equigenitalis adalah setidaknya perlu waktu 72 jam dan bisa memakan waktu
hingga 14 hari, tetapi biasanya tidak perlu lebih dari 6 hari pada suhu 37 °C
pada media yang diperkaya dengan heated bloaad dan suasana 5-10% C02. Waktu
dalam inkubasi minimal 7 hari dianjurkan sebelum sertifikasi kultur negatif
untuk T. equigenitalis. Setelah 72 jam di bawah kondisi kultur yang tepat
koloni mungkin kecil - hingga 2-3 mm - berair menjadi buram dan kekuningan
abu-abu, dan halus dengan seluruh tepinya.
Taylorella
equigenitalis adalah Gram-negatif, kecil, coccoid batang yang kadang-kadang
pleomorfik dan menunjukkan bipolar dalam pewarnaan. Ini menghasilkan katalase
dan fosfatase, dan sangat oksidase positif. Hal ini jika tidak biokimia tidak
reaktif, dan identifikasi akhirnya tergantung pada karakterisasi antigenik dari
isolat menggunakan antibodi spesifik. Sifat rewel T. equigenitalis membuatnya
sulit untuk mengisolasinya dan uji pengembang-biakan kuda jantan untuk deteksi
status karier telah digunakan sebagai tambahan penting untuk pemeriksaan
kultur.
Baru-baru
ini spesies lain dari Taylorella, T. asinigenitalis, telah diisolasi dari
keledai jantan dan kuda kuda di Amerika Serikat dan dari kuda di Eropa. Bakteri
ini belum dikaitkan dengan kejadian penyakit alami; ia berada dalam saluran
kelamin dari keledai jantan dan dapat disalurkan ke keledai lain dan kuda
ketika kawin.
Antibodi
T. equigenitalis whole killed dan kit aglutinasi latek menggunakan antibodi
ini. Spesifisitas organisme dan bukti kegagalan untuk bereaksi dengan oksidase
positf /katalase positif, bakteri Gram-negatif yang barangkali dibiakkan dari
saluran urogenital kuda adalah penting. Antibodi monoklonal telah dikembangkan
yang dapat digunakan dengan sukses untuk mengidentifikasi T. equigenitalis dan
membedakannya dari strain T. asinigenitalis.
Uji
Serologi: Tidak ada tes serologi terjelaskan sampai saat ini, dengan
sendirinya, deteksi infeksi yang handal untuk tujuan diagnosis dan kontrol.
Namun, uji serologi dapat digunakan sebagai tambahan untuk kultur T.
equigenitalis dalam skrining kuda betina yang akan dibiakkan bagi kuda jantan
karier, tetapi tidak harus digunakan sebagai pengganti untuk kultur.
Persyaratan
vaksin and diagnosa biologik: vaksin
efektif yang melindungi terhadap penyakit contagious equine metritis atau
mencegah kolonisasi oleh T. equigenitalis belum tersedia.
A.
PENDAHULUAN
Contagious
equine metritis pertama kali diketahui di Inggris (UK) pada tahun 1977 (12),
setelah itu terdiagnosa di sejumlah negara di seluruh dunia. Ini pertama kali
diungkapkan sebagai wabah penyakit yang ditandai dengan keluarnya cairan vagina
mukopurulen yang berasal dari peradangan endometrium dan serviks, mengakibatkan
infertilitas sementara. Sifat cepat alami dan pertumbuhan yang lambat dari
bakteri penyebab, Taylorella equigenitalis, menyebabkan kesulitan dalam upaya awal
pada kultur (22), namun penyakit ini telah direproduksi dengan tantangan
klitoral eksperimental dengan isolat bakteri pertumbuahn-laboratorium (21, 23,
27). Menggunakan kondisi kultur yang tepat, T. equigenitalis dapat diisolasi
dari cairan vagina terinfeksi.
Kuda
betina mungkin mengalami lebih dari satu episode penyakit dalam waktu singkat
(32). antibodi serum berlangsung selama 3-7 minggu setelah infeksi, tetapi
sering tidak terdeteksi sampai 15-21 hari setelah sembuh dari infeksi akut pada
kuda betina (14). Kebanyakan kuda betina pulih secara tidak maksimal, tetapi
beberapa mungkin menjadi karier T. equigenitalis untuk berbulan-bulan (21).
Kolonisasi
oleh T. equigenitalis paling jelas ditunjukkan oleh kultur dari swab yang
diambil dari relung fossa klitoris dan sinus, tapi mungkin bisa pulih dari
cervik dan endometrium dalam kultur murni (21). Karier tidak selalu
mempengaruhi konsepsi (33), dan dalam kasus seperti kehamilan dapat dilanjutkan
sehingga anak kuda lahir, menjadi terinfeksi oleh bagian bawah saluran untuk
melahirkan, dan dengan demikian juga menjadi terminal yang lama dan kartier
subklinis (30). Banyak kasus utama infeksi dengan T. equigenitalis pada kuda
betina adalah subklinis, dan indikator yang sering dari infeksi adalah kuda
betina kembali berahi prematur setelah
dikawinkan dengan kuda jantan karier.
Kuda
betina karier dan kuda jantan berperan sebagai reservoir T. equigenitalis,
tetapi kuda jantan, karena mereka kawin dengan banyak kuda betina, memainkan
peran yang jauh lebih penting dalam penularan bakteri. Membran urogenital kuda
jantan menjadi pengkontaminan saat di coitus, yang mengarah ke status karier
yang dapat bertahan selama berbulan-bulan atau bertahun-tahun (25).
Pemeriksaan
higienis dari kuda betina dan pencucian penis kuda yang tidak sanitary juga
dapat menyebar organisme. Sisi lain dari tubuh kuda tidak diketahui untuk
berlabuhnya T. equigenitalis. Kebanyakan kuda karier adalah klitoris karier
dari T. equigenitalis. Ketahanan jangka panjang dari organisme di dalam uterus,
meskipun jarang, dapat terjadi. Untuk mendeteksi bagaimana karier T.
equigenitalis, sampel swab serviks atau swab endometrium harus diambil secara
rutin sebagai tambahan sampling daerah klitoris dari semua kuda. Taylorella
equigenitalis dapat menyebabkan aborsi di kuda betina tapi ini jarang terjadi.
B. TEKNIK DIAGNOSTIK
Infeksi
sebelumnya dan vaksinasi tidak sepenuhnya melindungi (15), dan kegagalan
antibodi untuk bertahan berarti bahwa pengendalian infeksi telah mengandalkan
sepenuhnya pada pencegahan penularan melalui deteksi T. equigenitalis pada swab
dari membran urogenital. Terlepas dari kesulitan pengkulturan T. equigenitalis,
skrining kuda betina dan kuda jantan sebelum dan sementara di peternakan
pejantan telah berhasil mengeliminasi penyakit dari kuda ras thorougbred di
negara-negara menggunakan kode praktek secara sukarela. Ini berdasarkan pada
telah secara luas diadopsi kode praktek dewan pacuan kuda inggris Levy (16),
yang setiap tahun dan diperbarui sesuai kebutuhan; rekomendasi kunci dari Kode
dirangkum di bawah ini.
Pada
awal musim kawin, swab diambil dari semua kuda jantan, termasuk di musim kawin
pertama mereka, dari uretra, fossa uretra dan sinus, preputium penis dan cairan
pra-ejakulasi, pada dua kesempatan tidak kurang dari 7 hari terpisah. Kuda
betina diklasifikasikan menurut tingkat risiko bahwa mereka mewakili, dan
frekuensi sampling disesuaikan.
Kuda
berisiko tinggi didefinisikan sebagai: (a) T equigenitalis telah diisolasi
(status berisiko tetap tinggi sampai tiga set swab negatif telah diambil di
tiga periode oestrous yang berbeda di dalam masing-masing 2 tahun); (B) kuda
betina yang telah melalui tempat di mana T. equigenitalis telah diisolasi dalam
12 bulan sebelumnya; (C) kuda betina tiba dari Kanada, Perancis, Jerman,
Irlandia, Italia, Inggris dan Amerika Serikat yang telah dikawinkan selama
musim kawin lalu dengan kuda jantan penduduk luar negara-negara ini; d) semua
kuda betina yang telah di negara selain Kanada, Prancis, Jerman, Irlandia,
Italia, Inggris dan Amerika Serikat dalam 12 bulan terakhir. Kuda betina
'risiko rendah' adalah setiap kuda betina yang tidak dinyatakan sebagai
'berisiko tinggi'.
Kuda
jantan berisiko tinggi didefinisikan sebagai: (a) kuda jantan yang sebelumnya
telah digunakan untuk tujuan pembibitan; (B) kuda jantan yang mana T
equigenitalis telah diisolasi (status 'berisiko tinggi' akan tetap sampai
pengobatan telah dilakukan dan diperlukan hasil swab negatif); (C) kuda jantan
yang telah, dalam 12 bulan terakhir, pada setiap tempat di mana T equigenitalis
telah diisolasi; (D) kuda jantan yang telah dikawinkan kuda betina yang belum
diswab negatif sesuai dengan Kode Etik. 'Risiko rendah' kuda adalah setiap kuda
jantan tidak didefinisikan sebagai 'berisiko tinggi'. Ada masalah yang
berpotensi serius dengan contagious equine metritis pada kelompok kuda betina,
terutama mereka yang termasuk keturunan bukan ras thoroughbred.
Hasil
tes laboratorium untuk T. equigenitalis harus dimasukkan pada sertifikat yang
disetujui secara resmi, yang dikirim ke dokter hewan dan manajer farm kuda
pejantan yang mengawasi peternakan tersebut. sertifikat harus menerangkan nama
hewan, tempat dan tanggal dilakukan swab, nama dokter hewan pengambil swab,
identitas laboratorium pengujian, tanggal swab diterima dan dikultur oleh
laboratorium, dan apakah swab negatif atau positif, atau apakah kultur itu
ditumbuhi oleh bakteri lain ke tingkat yang laboratorium tidak bisa yakin bahwa
sejumlah kecil T. equigenitalis akan terdeteksi dan, karena itu, membutuhkan
satu set swab dikoleksi.
Kesulitan
dengan kultur T. equigenitalis disebabkan oleh keadaan yang mengharuskan
penggunaan sistem kontrol kualitas yang harus disetujui sebelum laboratorium
yang diizinkan untuk melakukan pengujian resmi contagious equine metritis dan
untuk mengeluarkan sertifikat hasil tes. Tugas pengawasan mutu harus dilakukan
oleh laboratorium mikrobiologi berpengalaman, terpercaya, dan tidak memihak,
yang berwenang untuk tujuan, yang tidak menangani dalam pengujian rutin swab
contagious equine metritis.
Pada
interval 6 bulan, swab diinokulasi ke dalam kultur campuran yang dirancang
untuk menguji kemampuan laboratorium untuk memulihkan dan mengidentifikasi T.
equigenitalis dalam menghadapi kontaminan, serta prosedur untuk hasil
pelaporan, harus dikirim ke laboratorium yang akan disetujui untuk pengujian
untuk bakteri ini. Daftar orang-orang laboratorium terbaik melalui kontrol
kualitas harus diterbitkan dalam jurnal kedokteran hewan yang banyak dibaca
oleh dokter hewan nasional. Dokter hewan dan manajer farm kuda pejantan yang
mengawasi breeding kuda betina dan kuda jantan harus hanya menerima sertifikat
yang disediakan oleh laboratorium yang telah terdaftar (disetujui) saat ini
untuk tujuan itu.
Setiap
kuda betina dengan eksudat vagina abnormal, atau kembali ke berahi prematur,
harus diselidiki dan dikelola seakan terinfeksi oleh T. equigenitalis sampai
hasil uji laboratorium membuktikan sebaliknya. Penyebab lain dari wabah
endometritis termasuk Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus zooepidemicus dan
jenis kapsul tertentu dari Klebsiella pneumoniae. Swab harus diperiksa untuk
bakteri ini, dan upaya harus dilakukan untuk kultur dan mengidentifikasi K.
pneumoniae dan P. aeruginosa sehingga jelas diferensial diagnosisnya.
Jika
pembawa dari T. equigenitalis terdeteksi, organisme dapat dihilangkan dengan
pengobatan dengan antibiotik sistemik dikombinasikan dengan pencucian dengan
disinfektan pada membran genital yang terkena (1). Perhatian khusus harus
diberikan untuk pembersihan relung fossa klitoris dan sinus dari kuda betina,
di mana kolonisasi oleh T. equigenitalis sering ditemukan pada hewan karier.
Sebuah
pengobatan dapat berlangsung beberapa minggu dan mungkin perlu diulang sebelum
swabbing secara intensif tetap gagal untuk menyembuhkan T. equigenitalis pada
kuda jantan dan kuda betina (13). Sejumlah besar kuda karier bisa bias untuk
beberapa program pengobatan. Ini mungkin memerlukan operasi dan ablasi sinus
klitoris untuk mengeliminasi permanen dari negara pembawa pada hewan tersebut.
Langkah-langkah
pengendalian untuk negara-negara yang dianggap sebagai bebas dari infeksi T.
equigenitalis harus didasarkan pada skrining hewan sebelum impor dan /atau
selama masa karantina pasca-impor menggunakan swabbing dan rezim pengujian
secara luas berdasarkan yang dijelaskan di atas untuk populasi breeding.
1.
Identifikasi Agen (uji penetapan untuk perdagangan internasional)
Berbagai
bakteri dapat muncul pada membran urogenital kuda kommensalisma tidak berbahaya
dan dapat mengganggu kultur T. equigenitalis. Beberapa awalnya mungkin muncul
dalam jumlah kecil, tetapi gandakan pada swab sebelum dikultur. Pertumbuhan
berlebih dari organisme ini di plate kultur dapat mengaburkan munculnya T.
equigenitalis. Swab harus ditempatkan dalam media transportasi dengan arang
aktif, seperti media Amies, untuk menyerap penghambatan hasil ikutan
metabolisme bakteri (28). Seiring waktu, jumlah penurunan T. equigenitalis pada
swab dengan waktu dan efek lebih jelas pada suhu yang lebih tinggi (24).
Swab
harus tetap dingin selama transportasi dan harus tiba di laboratorium tidak boleh
terlambat dari 24-48 jam setelah mereka dibawa. Kultur negatif hasil dari swab
belapis lebih dari 48 jam setelah mereka dibawa tidak dapat dipercaya.
pengobatan antibiotik untuk penyebab apa pun harus berhenti setidaknya 7 hari
sebelum swabbing. Kehadiran antibiotik dapat membuat kerusakan sublethal dari
T. equigenitalis, yang tetap berlanjut pada membran urogenital, tetapi tidak
dapat tumbuh pada media laboratorium.
Setiap
swab harus diinokulasi ke 5% (v/v) darah yang dipanaskan, ('cokelat'), plat agar,
diproduksi dengan memanaskan media cair, yang mengandung darah, pada suhu 70-80
°C selama 12 menit. Ketika didinginkan sampai 45-50 °C, trimethoprim (1 µg/ml),
klindamisin (5 mg/ml), dan amfoterisin B (5 ug/ml), ditambahkan ke media,
Timoney et al. (31). Timidin, yang akan menonaktifkan trimetoprim, muncul pada
media bakteriologis yang mengandung pepton, sehingga sangat penting untuk
menambahkan 5% darah kuda lisis pada tahap ini.
Darah
kuda lisis mengandung timidin fosforilase, yang akan menonaktifkan timidin,
sehingga memungkinkan trimetoprim untuk mengerahkan efek selektif. Ini adalah
media yang lebih disukai untuk mengisolasi T. equigenitalis; media ini telah
berhasil digunakan untuk mengisolasi sama baiknya kedua biotipe patogen ini dan
untuk menghilangkan pertumbuhan banyak bakteri komensal. Sebagai inhibitor
kemungkinan dapat mencegah isolasi beberapa strain T. equigenitalis, swab juga
harus diinokulasi ke plate dari 5% 'cokelat' agar darah diperkaya agar pepton
basa yang mengandung sistein tambahan (0.83 mM), natrium sulfit (1,59 mM) dan
fungisida (5 µg/ml amfoterisin B).
Taylorella
equigenitalis akan tumbuh pada agar darah, tapi dapat mentolerir kurang dari
kondisi ideal yang lebih baik bila ditanam di 'cokelat' agar darah seperti
dijelaskan di atas. Beberapa pabrikan1 menghasilkan agar pepton basa yang
kualitasnya dikendalikan karena kemampuannya untuk mendukung pertumbuhan T.
equigenitalis. Kualitas agar komersial harus dikonfirmasi oleh laboratorium
pengujian. Sifat penting yang baik media T. equigenitalis adalah tidak adanya
fermentasi karbohidrat. Ini tidak meningkatkan pertumbuhan T. equigenitalis,
tetapi fermentasi mereka dengan bakteri lainnya menghambat T. pertumbuhan
equigenitalis (4, 15).
Media
ketiga yang mengandung streptomisin sulfat (200 µg/ml) kadang-kadang digunakan
sebagai beberapa isolat T. equigenitalis yang tahan pada antibiotik konsentrasi
ini, yang berfungsi untuk mengurangi tingkat pertumbuhan bakteri lain yang
mungkin muncul sedikit T. equigenitalis (28). Namun, biotipe
streptomycin-sensitif sekarang adalah strain paling umum diisolasi dan tidak
akan terdeteksi pada media ini; akibatnya, itu hanya harus digunakan dalam
hubungannya dengan media tanpa streptomisin.
Pertumbuhan
dengan bakteri lain, untuk mirabilis misalnya Proteus, bagaimanapun, mungkin
terlalu luas bahwa laboratorium harus mencatat bahwa mereka tidak bisa
mengeluarkan hasil negatif. Dalam acara ini, lebih lanjut swab harus diminta
dengan harapan bahwa masalah tersebut tidak akan terulang kembali.
Semua
media kultur yang disiapkan harus dikenakan kontrol kualitas dan harus
mendukung pertumbuhan organisme tersangka dari inokulum kecil, sebelum
digunakan oleh mereka pada sampel tersangka. Strain referensi dari T.
equigenitalis juga harus dikultur secara paralel dengan sampel uji untuk
memastikan bahwa kondisi kultur yang optimal untuk isolasi organisme ini.
Sifat
rewel T. equigenitalis membuatnya sulit untuk diisolasi. Uji breeding kuda
jantan telah digunakan untuk meningkatkan sensitivitas deteksi karier dan
berfungsi sebagai tambahan yang berharga untuk pemeriksaan kultur. Jumlah
Taylorella yang secara mekanis terbawa oleh kuda jantan bisa sangat rendah dan
mungkin terlewatkan oleh swab kultur, tetapi dapat dideteksi setelah
perbanyakan di kuda betina yang telah uji breeding. Penggunaan uji breeding
sebagai alat diagnostik menjadi sangat penting di negara-negara yang dianggap
bebas dari Contagious Equine Metritis.
Adakalanya,
membran urogenital kuda jantan atau kuda betina akan terus menerus dikolonisasi
oleh bakteri lain yang mengganggu diagnosis, dan itu akan membuktikan
diperlukan untuk mencoba menghilangkan ini dengan mencuci dan pengobatan
antibiotik. Swabbing untuk T. equigenitalis tidak akan disarankan sampai
setidaknya 7 hari setelah pengobatan dihentikan. Penggunaan media Timoney ini
(31), yang dijelaskan di atas, harus mengatasi kesulitan ini dalam banyak
kasus. Hal ini penting untuk menekankan bahwa di samping tes setiap hari,
piring tambahan harus diinokulasi dengan budaya T. equigenitalis untuk memeriksa
setiap batch media akan mendukung pertumbuhan.
Pelat
harus diinkubasi pada 35-37 °C pada 5-10% (v/v) C02 di udara atau dengan
menggunakan stoples lilin. Setidaknya 72 jam biasanya diperlukan sebelum koloni
T. equigenitalis menjadi terlihat, setelah waktu pemeriksaan harian yang
dibutuhkan. deteksi visual koloni bisa memakan waktu hingga 14 hari (35).
Standar
waktu inkubasi minimal 7 hari dianjurkan sebelum pensertifikasian kultur
negatif untuk T. equigenitalis. Pelat harus diperiksa untuk kontaminan setelah
inkubasi 24 jam pertama. Koloni T. equigenitalis diameternya mungkin sampai 2-3
mm, halus dengan seluruh tepinya, mengkilap dan kekuningan abu-abu.
Laboratorium harus menyadari bahwa negara-negara tertentu membutuhkan masa
inkubasi yang lama sebagai prosedur standar dan karena itu harus memastikan
persyaratan impor tertentu dan /atau menunjukkan masa inkubasi pada temuan
kultur yang didasarkan.
Taylorella
equigenitalis adalah Gram-negatif, nonmotile, bacillus atau cocco-bacillus yang
sering pleomorfik (sampai 6 m panjang) dan mungkin menunjukkan pewarnaan
bipolar. Katalase positif, fosfatase positif, dan sangat oksidase positif
(lihat ref. 5 untuk metode, untuk memeriksa katalase, fosfatase dan aktifitas
oksidase). Hal ini dinyatakan tidak bereaksi dalam uji untuk aktifitas
biokimia. Jika organisme tumbuh lambat terisolasi yang sesuai dengan deskripsi
untuk morfologi sel dan yang sangat oksidase positif, itu harus diuji untuk
reaktivitas dengan antiserum T-equigenitalis-spesifik.
Berbagai
tes serotipe telah dikembangkan mulai dalam hal kompleksitas dari slide
aglutinasi ke direct atau indirect imunofluoresensi. Setiap metode memiliki
kelebihan dan kekurangan. Kerugian dari uji slide aglutinasi adalah bahwa
kadang-kadang autoagglutinasi dari isolat terjadi: kultur di botol C02 di
udara, sebagai kebalikan dalam botol lilin, dapat mengurangi autoagglutinas
(29).
Telah
dikatakan bahwa immunofluorescence dapat digunakan untuk mengidentifikasi
isolat autoagglutinatnya, beberapa pekerja telah melaporkan reaksi silang
dengan Mannheimia haemolytica tapi ini sangat jarang. Jika reaksi silang
diduga, mungkin perlu mengulang uji menggunakan antisera serapan (29). Uji
imunofluoresensi dapat ditingkatkan dengan penggunaan antibodi monoklonal, yang
sekarang tersedia2.
_________________
1. Sebagai contoh, Mast Diagnostics,
Mast Rumah, Derby Road, Bootle, Merseyside L20 1EA, Inggris Raya (UK), dan Lab
M, Tomley Rumah, Cuci Lane di Bury BL9 6AU, UK.
2. Institut Pourquier, 326 rue de la
Galera, Parc Euromedicine, 34090 Montpelier, Prancis. E-mail:
info@institut-pourquier.fr
Antiserum
diproduksi dengan cara pemvaksinasian kelinci dengan membunuh T. equigenitalis.
Sejumlah rezim imunisasi yang berbeda dapat digunakan, mulai dari yang
digunakan untuk memproduksi antisera tipe Escherichia coli (26), untuk
imunisasi bersama-sama dengan adjuvant, seperti Freund tidak lengkap. Antibodi
monoklonal yang tersedia secara komersial yang menyediakan sarana yang sangat
spesifik mengidentifikasi T. equigenitalis.
Sebuah
strain standar, seperti NCTC111843, seharusnya digunakan untuk imunisasi.
Namun, pertimbangan yang paling penting adalah kekhususan dari antiserum yang
dihasilkan. Ini seharusnya menggumpalkan T. equigenitalis, tetapi gagal untuk
menggumpalkan bakteri lain yang mungkin dibiakkan dari membran urogenital kuda,
bahkan jika jarang. Secara khusus, seharusnya tidak menggumpalkan setiap batang
oxidase-positif dan Gram-negatif, seperti Mannheimia haemolytica,
Actinobacillus equuli, Bordetella bronchiseptica (yang mana T. equigenitalis
berkaitan erat, lihat ref. 9), dan Pseudomonas aeruginosa.
Baru-baru
ini spesies lain dari Taylorella, T. asinigenitalis, telah diisolasi dari
keledai jantan di Amerika Serikat (17) dan dari kuda jantan di Eropa (6). Baru
saja dijelaskan Bakteri, yang belum berhubungan dengan penyakit alami, berada
dalam saluran kelamin dari keledai jantan dan dapat ditularkan ke keledai dan
kuda saat kawin.
Selain
itu adalah serupa, meskipun tidak identik, penampilan koloni dan karakteristik
kultur dan memberikan hasil uji biokimia identik dengan yang digunakan untuk
mengkonfirmasi identitas T. equigenitalis. Bahkan ada serologis reaktivitas
silang antara dua organisme. Di National Veterinary Services Laboratories
(NVSL) di Ames, Iowa, USA4, dan di Veterinary Laboratories Agency (VLA), Bury
St Edmunds, Inggris (UK)4, diferensiasi T. asinigenitalis dari T. equigenitalis
sebisa mungkin menggunakan polymerase chain reaction ( PCR).
_________________
3. diperoleh dari National Collection
of Type Cultures, Colindale, London, UK.
4. Untuk informasi lebih lanjut
hubungi NVSL di NVSL, P.O. Box 844, Ames, Iowa 50010, USA. E-mail:
NVSL_Concerns@aphis.usda.gov atau VLA di VLA, Rougham Hill, Bury St Edmunds,
IP33 2RX, UK. E-mail: bury-st- edmunds@vla.defra.gsi.gov.uk
Sebuah
kit aglutinasi lateks tersedia secara komersial untuk identifikasi antigen T.
equigenitalis. Hal ini didasarkan pada antibodi poliklonal diproduksi
menggunakan metode yang sama dengan yang dijelaskan di atas. Ini banyak
digunakan oleh laboratorium pengujian rutin untuk konfirmasi identitas koloni
yang tumbuh pada media selektif yang memberikan reaksi biokimia yang konsisten
dengan T. equigenitalis. Sebagai T. equigenitalis adalah antigen yang relatif
berbeda, dan sejumlah kecil antibodi reaktif silang yang dengan mudah diserap
selama produksi reagen, tes telah terbukti sangat spesifik dan sensitif. Perlu
ditekankan bahwa hal itu tidak akan selalu membedakan strain T. equigenitalis
dari T. asinigenitalis.
Sebuah
metode PCR telah digunakan untuk mendeteksi T. equigenitalis dan dibandingkan
dengan metode kultur di Belanda dan Jepang (2, 7, 10). Dalam studi ini, yang
jauh lebih tinggi dari deteksi dengan PCR ditemukan adalah kultur, bahkan di
antara kuda diimpor dari sumber tanpa kejadian penyakit sebelumnya dari infeksi
T. equigenitalis atau penyakit klinis.
Para
pakar menganjurkan bahwa karier adalah lebih luas penyebarannya dari pada yang
diyakini sebelumnya, dan bahwa variasi genetik baru-baru ini ditemukan di
antara strain (8, 18) mungkin berhubungan dengan perbedaan patogenisitas. PCR
juga telah digunakan di Inggris (11). Itu sangat spesifik dan mampu mendeteksi
jumlah yang sangat kecil dari T. equigenitalis di hadapan jumlah yang sangat
besar dari bakteri yang berlatar belakang flora yang dipanen dari plate kultur
yang diinokulasi dengan sampel dari saluran urogenital kuda.
Baru-baru
ini di Jepang, bidang penerapan PCR dalam pemberantasan contagious equine
metritis dievaluasi. Hal itu menunjukkan bahwa PCR lebih sensitif dibandingkan
kultur untuk mendeteksi T. equigenitalis dari swab genital kuda di lapangan (2,
3, 19, 20). Pada tahun 2004-2005, real-time PCR dikembangkan di Inggris untuk
digunakan langsung pada swab genital dan dibandingkan dengan kultur (34).
Tidak
ada perbedaan yang signifikan dalam kinerja langsung (direct) PCR dan kultur,
tetapi PCR memiliki keuntungan tambahan dari kecepatan hasil dan juga dibedakan
T. equigenitalis dari T. asinigenitalis. Teknik yang menjanjikan ini perlu
lebih lengkap dan luas dievaluasi, terutama untuk deteksi negara karier pada
kuda jantannya.
2.
Uji Serologi
Tidak
ada tes serologi sampai saat ini, sebagai deteksi infeksi andal untuk diagnosis
dan kontrol. Namun, Uji complement fixation telah berhasil digunakan sebagai
tambahan untuk kultur untuk T. equigenitalis dalam skrining kuda betina antara
21 dan 45 hari setelah dibiakkan untuk menduga kuda jantan karier.
C. PERSYARATAN UNTUK VAKSIN DAN DIAGNOSA
BIOLOGIK
Vaksin
yang efektif yang melindungi terhadap Contagious Equine Metritis atau mencegah
kolonisasi oleh T. equigenitalis belum tersedia.
DAFTAR
PUSTAKA
1. ANON
(1979). Report of an International CEM meeting. Vet.Rec., 105, 337-338.
2. ANZAI
T., EGUCHI M., SEKIZAKI T., KAMADA M., YAMAMOTO K. & OKUDA T. (1999).
Development of a PCR test for rapid diagnosis of contagious equine metritis. J.
Vet. Med. Sci., 61, 1287-1292.
3. ANZAI
T., WADA R., OKUDA T. & AOKI T. (2002). Evaluation of the field application
of PCR in the eradication of contagious equine metritis from Japan. J. Vet.
Med. Sci., 64, 999-1002.
4. ATHERTON
J.G. (1983). Evaluation of selective supplements used in media for the
isolation of the causative organism of contagious equine metritis. Vet. Rec.,
113, 299-300.
5. BARROW
G.I. & FELTHAM R.K.A. (1993). Cowan and Steels's Manual for the
Identification of Medical Bacteria, Third Edition. Cambridge University Press,
Cambridge, UK.
6. BAVERUD
V., NYSTROM C. & JOHANSSON K.-E. (2006). Isolation and identification of
Taylorella asinigenitalis from the genital tract of a stallion, first case of a
natural infection. Vet. Microbiol., 116, 294-300.
7. BLEUMINK-PLUYM
N.M.C., HOUWERS D.J., PARLEVLIET J.M. & COLENBRANDER B. (1993). PCR-based
detection of CEM agent. Vet. Rec., 133, 375-376.
8. BLEUMINK-PLUYM
N.M.C., TER LAAK E.A. & VAN DER ZEIJST B.A.M. (1990). Epidemiologic study
of Taylorella equigenitalis strains by field inversion gel electrophoresis of
genomic restriction endonuclease fragments. J. Clin. Microbiol., 28, 2012-2016.
9. BLEUMINK-PLUYM
N.M.C., VAN DIJK L., VAN VLIET A.H., VAN DER GIESSEN J.W. & VAN DER ZEIJST
B.A. (1993). Phylogenetic position of Taylorella equigenitalis determined by
analysis of amplified 16S ribosomal DNA sequences. Int. J. Syst. Bacteriol.,
43, 618-621.
10. BLEUMINK-PLUYM
N.M.C., WERDLER M.E.B., HOUWERS D.J., PARLEVLIET J.M., COLENBRANDER B. &
VAN DER ZEIJST B.A.M. (1994). Development and evaluation of PCR test for
detection of Taylorella equigenitalis. J. Clin. Microbiol., 32, 893-896.
11. CHANTER
N., VIGANO F., COLLIN N.C. & MUMFORD J.A. (1998). Use of a PCR assay for
Taylorella equigenitalis applied to samples from the United Kingdom. Vet. Rec.,
143, 225-227.
12. CROWHURST
R.C. (1977). Genital infection in mares. Vet. Rec., 100, 476.
13. CROWHURST
R.C., SIMPSON D.J., GREENWOOD R.E.S. & ELLIS D.R. (1979). Contagious equine
metritis. Vet. Rec., 104, 465.
14. DAWSON
F.L.M., BENSEN J.A. & CROXTON-SMITH P. (1978). The course of serum antibody
development in two ponies experimentally infected with contagious metritis.
Equine Vet. J., 10, 145-147.
15. FERNIE,
BATTY I., WALKER P.D., PLATT H., MACKINTOSH M.E. & SIMPSON D.J. (1980).
Observations on vaccine and post-infection immunity in contagious equine
metritis. Res. Vet. Sci., 28, 362-367.
16. HORSERACE BETTING
LEVY BOARD (2005). Code of Practice on Contagious Equine
Metritis, Equine Viral Arteritis, Equine Herpesvirus, and Guidelines on Strangles.
Horserace Betting Levy Board, London, UK.
http://www.hblb.org.uk/hblbweb.nsf/Codes%20of%20Practice%202005.pdf
17. JANG
S.S., DONAHUE J.M., ARATA A.B., GORIS J., HANSEN L.M., EARLEY D.L., VANDAMME
P.A., TIMONEY P.J. & HIRSH D.C. (2001). Taylorella asinigenitalis sp. nov.,
a bacterium isolated from the genital tract of male donkeys (Equus asinus).
Int. J. Syst. Evol. Microbiol., 51, 971-976.
18. LAPAN
G., AWAD-MASALMEH M., HARTIG A. & SILBER R. (1991). Investigations on
Taylorella equigenitalis; cell wall proteins, DNA fingerprints, plasmids,
adhesion and cytotoxicity. J. Vet. Med. [BJ, 38, 589-598.
19. MISEREZ R., FREY
J., KRAWINKLER M. &
NICOLET J. (1996).
Identifikation und Diagnostik von
Taylorella equigenitalis mittels einer DNA-Amplifikationsmethode (PCR).
Schweiz. Arch. Tierheilk., 138, 115-120.
20. MOORE
J.E., BUCKLEY T.C., MILLAR B.C., GIBSON P., CANNON G., EGAN C., COSGROVE H.,
STANBRIDGE S., ANZAI T., MATSUDA M. & MURPHY P.G. (2001). Molecular
surveillance of the incidence of Taylorella equigenitalis and Pseudomonas
aeruginosa from horses in Ireland by sequence-specific PCR. Equine Vet. J., 33,
319-322.
21. PLATT H., ATHERTON
J.G., DAWSON F.L.M. &
DURRANT D.S. (1978). Developments in
contagious equine metritis. Vet. Rec., 102, 19.
22. PLATT
H., ATHERTON J.G., SIMPSON D.J., TAYLOR C.E.D., ROSENTHAL R.O., BROWN D.F.J.
& WREGHITT T.G. (1977). Genital infection in mares. Vet. Rec., 101, 20.
23. ROGERSON B.A., CONDRON
R.J., BAKER J. & CRAVEN J.A.
(1984). Experimental infection
of mares with Haemophilus equigenitalis. Aust. Vet.
J., 61, 392-395.
24. SAHU
S.P., DARDIRI A.H., ROMMEL F.A. & PIERSON R.E. (1979). Survival of
contagious equine metritis bacteria in transport media. Am. J. Vet. Res., 40,
1040-1042.
25. SCHLUTER
H., KULLER H., FREIDREICH U., SELBITZ H., MARWITZ T., BEYER C. & ULLRICH E.
(1991). Epizootiology and treatment of contagious equine metritis (CEM), with
particular reference to the treatment of infected stallions. Prakt. Tierarzt.,
72, 503-511.
26. SOJKA
W.J. (1965). Escherichia coli in Domestic Animals and Poultry. Commonwealth Review
Series No.7.
27. SWANEY
L.M. & SAHU S.P. (1978). CEM: bacteriological methods. Vet. Rec., 102, 43.
28. SWERCZEK
T.W. (1978). Inhibition of the CEM organism by the normal flora of the
reproductive tract. Vet. Rec., 103, 125.
29. TER
LAAK E.A. & WAGENAARS C.M.F. (1990). Autoagglutination and the specificity
of the indirect fluorescent antibody test applied to the identification of
Taylorella equigenitalis. Res. Vet. Sci., 49, 117-119.
30. TIMONEY
P.J. & POWELL D.G. (1982). Isolation of the contagious equine metritis
organism from colts and fillies in the United Kingdom and Ireland. Vet. Rec.,
111, 478-482.
31. TIMONEY
P.J., SHIN S.J. & JACOBSON R.H. (1982). Improved selective medium for
isolation of the contagious equine metritis organism. Vet. Rec., 111,107-108.
32. TIMONEY
P.J., WARD J. & KELLY P. (1977). A contagious genital infection of mares.
Vet. Rec., 101, 103.
33. TIMONEY
P.J., WARD J. & MCARDLE J.F. (1978). CEM and the foaling mare. Vet. Rec.,
102, 246-247.
34. WAKELEY
P.R., ERRINGTON J., HANNON S., ROEST H.I.J., CARSON T. HUNT B. & HEATH P.
(2006). Development of a real time PCR for the detection of Taylorella
equigenitalis directly from genital swabs and discrimination from T.
asinigenitalis. Vet. Microbiol., 118, 247-254.
35. WARD
J., HOURIGAN M., MCGUIRK J. & GOGARTY A. (1984). Incubation times for
primary isolation of contagious equine metritis organism. Vet. Rec., 114, 298.
******
Penulis:
Drh Giyono Trisnadi, Terjemahan dari Judul Asli: CONTAGIOUS EQUINE METRITIS CHAPTER 2.5.2. OIE Terrestrial Manual.
******